Diversidad morfo-genética de Cercospora en soja. Detección precoz de la infección por Cercospora kikuchii

Abstract

Entre los agentes causales de enfermedades infecciosas en la soja, las especies del género Cercospora constituyen un problema importante. El tizón de la hoja y la mancha púrpura de la semilla causada por Cercospora kikuchii y la mancha ojo de rana producida por Cercospora sojina, reducen el valor nutricional de la planta y provocan severo deterioro de las cosechas. Los objetivos de este trabajo fueron el aislamiento de las especies de Cercospora que ocasionaron patología en las plantas de soja, cultivadas en diferentes regiones de la provincia de Santa Fe durante las campañas 2005/2006-2008/2009, su caracterización fenpotípica utilizando diferentes medios de cultivo y su caracterización molecular mediante la amplificación de ISSR, RAPD-PCR y las regiones ITS del ADNr, las que se analizaron mediante RFLP-PCR y se secuenciaron. Los grupos formados por los aislamientos genéticamente relacionados, se volcaron sobre un mapa de la provincia de Santa Fe, para visualizar su distribución espacial y temporal. Se desarrollaron métodos de detección precoz de estas especies fúngicas y un modelo experimental de infección de plantas de soja con Cercospora. Se concluyó que las poblaciones argentinas de Cercospora kikuchii y Cercospora sojina son fenotípica, genotípica y geográficamente variables, lo que constituye un grupo muy heterogéneo. Una alta homología en las secuencias ITS confirmó que los hongos analizados pertenecían al género Cercospora, no encontrándose diferencias entre las dos especies. Tanto la técnica de Dot blot como la PCR permitieron detectar precozmente estas especies en la planta.

Among the infectious disease-causing agents in soybean, fungi of the genus Cercospora have become a significant problem. Leaf blight and purple seed stain produced by Cercospora kikuchii, and frogeye leaf spot, produced by Cercospora sojina, are quite common, reducing the plant nutritional value and causing serious harvest damages. The objectives of this work were the isolation of the Cercospora species which produced pathology in soybean plants grown in different regions of Santa Fe province during 2005/2006-2008/2009 campaigns, their phenotypical characterization using different culture media, followed by a molecular characterization by means of ISSR, RAPD-PCR and ITS of DNAr. ITS were analyzed by RFLP-PCR and finally sequenced. Groups formed by the genetically related isolates were located on a Santa Fe province map so as to visualize their spatial and temporal distribution. Different techniques for detecting fungi in the plant were started up, together with the development of an experimental model to infect soy plants with Cercospora. It could be concluded that Argentinian populations of Cercospora kikuchii and Cercopora sojina are phenotypically, genotypically and geographically variable, thus constituting a very heterogeneous group. A high homology in ITS sequences,confirmed that the analyzed fungi belonged to the genus Cercospora, no differences being found between the two species. Both Dot blot technique as PCR allowed early detection of these fungal species in the plant.