https://hdl.handle.net/11185/13 Wed, 27 May 2026 18:29:19 GMT 2026-05-27T18:29:19Z https://hdl.handle.net/11185/8837 Sistemas de biopurificación para el tratamiento de efluentes contaminados con plaguicidas. Incorporación de la acción de oligoquetos terrestres Clebot, Aldana Carolina El uso intensivo de plaguicidas y la gestión inadecuada de residuos generan impactos negativos sobre los ecosistemas. En esta Tesis se desarrollaron nuevas biomezclas para Sistemas de Biopurificación (SBP), utilizando residuos orgánicos disponibles en la provincia de Santa Fe: cama de pollo, aserrín de eucaliptus y lodos cloacales activados, estabilizados mediante vermicompostaje con Eisenia fetida. Se obtuvieron sustratos ricos en materia orgánica, estables y no patógenos, que luego se combinaron con suelo y rastrojo de trigo para formular biomezclas destinadas a la remediación de cinco plaguicidas de uso global. Las biomezclas con vermicompost mostraron una degradación más rápida y eficiente de los plaguicidas que una biomezcla de referencia y el suelo solo, asociada a una mayor actividad biológica. Además, redujeron la toxicidad residual, evidenciada mediante bioensayos con semillas y lombrices. Los estudios de adsorción revelaron comportamientos complejos influenciados por la polaridad y solubilidad de los plaguicidas, permitiendo relacionar adsorción y degradación mediante modelos matemáticos. Finalmente, se demostró que la vermirremediación puede integrarse como etapa complementaria en biomezclas agotadas. Los resultados confirman el potencial de los SBP con vermicompost como una estrategia sostenible, innovadora y replicable para remediar contaminación puntual por plaguicidas y valorizar residuos orgánicos.; The intensive use of pesticides and the inadequate management of waste generate negative impacts on ecosystems. In this Thesis, new biomixes for Biopurification Systems (BPS) were developed using organic wastes available in the province of Santa Fe: poultry litter, eucalyptus sawdust, and activated sewage sludge, stabilized through vermicomposting with Eisenia fetida. Organic matter-rich, stable, and pathogen-free substrates were obtained and subsequently combined with soil and wheat straw to formulate biomixes intended for the remediation of five globally used pesticides. The biomixes containing vermicompost showed faster and more efficient pesticide degradation than a reference biomix and soil alone, which was associated with higher biological activity. In addition, they reduced residual toxicity, as evidenced by bioassays with seeds and earthworms. Adsorption studies revealed complex behaviors influenced by the polarity and solubility of the pesticides, allowing adsorption and degradation processes to be related through mathematical models. Finally, it was demonstrated that vermiremediation can be integrated as a complementary stage for exhausted biomixes. The results confirm the potential of vermicompost-based BPS as a sustainable, innovative, and replicable strategy for the remediation of point-source pesticide contamination and the valorization of organic waste. Fil: Clebot, Aldana Carolina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Wed, 06 May 2026 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/8837 2026-05-06T00:00:00Z https://hdl.handle.net/11185/8835 Interacciones entre la función mitocondrial y vías de señalización reguladoras del crecimiento en plantas Coronel, Florencia Paola Las plantas, como organismos sésiles, deben ajustar su crecimiento y metabolismo a las condiciones del ambiente en el que habitan. En condiciones óptimas, destinan sus recursos al crecimiento, mientras que bajo estrés los redirigen para mantener la homeostasis energética y favorecer la supervivencia. El citocromo c (CYTc) es un componente de la cadena de transporte de electrones mitocondrial, acoplado a la síntesis de ATP. En trabajos previos demostramos que plantas deficientes en CYTc presentan defectos en el crecimiento y desarrollo asociado a la disminución en la actividad de la vía TOR. En esta tesis, investigamos el rol de CYTc como vínculo entre la producción de energía mitocondrial, la reprogramación metabólica y las vías de señalización que controlan el crecimiento y las respuestas a estrés en A. thaliana. Nuestros resultados muestran que la reducción de CYTc activa la vía SnRK1, responsable de activar respuestas a estrés, asociada con cambios metabólicos como el aumento de aminoácidos libres, posiblemente vinculado a una mayor actividad autofágica y su uso como fuente alternativa de energía. Además, estas plantas presentan menor susceptibilidad a diferentes tipos estrés abiótico. En oscuridad prolongada, muestran una utilización más eficiente del almidón y una disponibilidad sostenida de aminoácidos, mientras que, bajo estrés térmico, el aumento en la acumulan azúcares solubles podría contribuir a la aclimatación de estas mutantes al estrés. Adicionalmente, nuestros resultados muestran que la señalización hormonal modula este estado metabólico, ya que el tratamiento con giberelinas atenúa las alteraciones observadas en las plantas deficientes en CYTc en respuesta a estrés térmico. Por último, demostramos que CYTc regula el crecimiento y desarrollo radicular, afectando tanto la proliferación como la elongación celular. En conjunto, demostramos que CYTc actúa como un regulador central que conecta metabolismo, crecimiento y respuestas al estrés en plantas.; As sessile organisms, plants must adjust their growth and metabolism to the environmental conditions. Under optimal growth conditions, energy and resources are primarily allocated to growth, whereas under stress, plants activated metabolic reprogramming to maintain energy homeostasis and promote survival. Cytochrome c (CYTc) is a component of the mitochondrial electron transport chain, and is essential for efficient ATP production. In previous research, we demonstrated that CYTc-deficient plants exhibit growth and developmental defects associated with reduced TOR pathway activity. In this thesis, we investigated the role of CYTc as a regulatory component linking energy production, metabolic reprogramming, and signaling pathways that control plant growth and stress responses in Arabidopsis. Our results show that decreased CYTc levels activate the SnRK1 pathway, a central regulator of stress responses, followed by metabolic changes such as free amino acids accumulation linked to higher levels of autophagy, suggesting their mobilization as alternative energy source under mitochondrial deficiency. Consistently, CYTc-deficient plants display enhanced tolerance to stress conditions compared to wild-type plants. Under extended darkness, they exhibit more efficient starch utilization and sustained amino acid availability, whereas under heat stress, the accumulation of soluble sugars may contribute to stress acclimation. In addition, hormonal signaling modulates this metabolic state, since gibberellin treatment attenuates the stress-tolerant phenotype of CYTc-deficient plants, accompanied by reduced autophagy and altered metabolite accumulation. Additionally, we addressed how mitochondrial activity influences root development by affecting both cell proliferation and elongation. Together, our findings identify CYTc as a central regulator linking energy metabolism, metabolic reprogramming, and growth control under normal conditions and during stress acclimation in plants. Fil: Coronel, Florencia Paola. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Wed, 22 Apr 2026 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/8835 2026-04-22T00:00:00Z https://hdl.handle.net/11185/8832 Factores de transcripción de la familia homeodominio-cierre de leucinas de Arabidopsis thaliana en el desarrollo radicular y las respuestas al medioambiente Mora, Catia Celeste El desarrollo del sistema radicular es fundamental para la adaptación y supervivencia de las plantas. Su arquitectura responde dinámicamente a factores abióticos como disponibilidad de agua, nutrientes y salinidad. Los factores de transcripción (FT) son reguladores clave de este proceso. En esta tesis estudiamos AtHB40 y sus parálogos AtHB53 y AtHB21, pertenecientes al clado VI de la familia HD-Zip I de Arabidopsis thaliana, analizando sus funciones bajo condiciones óptimas y de estrés salino. AtHB40 y AtHB53 se expresan en raíces desde estadios tempranos. AtHB40 se localiza en la zona meristemática, columela y sistema vascular de la raíz primaria, mientras que AtHB53 muestra mayor expresión en raíces laterales. No se detectó expresión de AtHB21 en raíces. AtHB40 inhibe el crecimiento de la raíz primaria reprimiendo indirectamente CICLINAB1.1, y presenta regulación cruzada con el ácido abscísico (ABA): ABA induce su expresión, mientras que AtHB40 regula negativamente a esta hormona. El ácido indolacético (IAA) activa a AtHB40 en la punta de la raíz, donde controla directamente la expresión de LAX3. AtHB40 regula negativamente la respuesta gravitrópica mediante el control de transportadores de auxinas. AtHB53 actúa como regulador de AtHB40 en la raíz primaria, mediando su respuesta a IAA. Ambos FT reprimen el crecimiento de raíces laterales de modo hormonalmente regulado. Bajo estrés salino (150 mM NaCl), los mutantes athb40 y athb53 presentan mayor tasa de germinación, mejor supervivencia y mayor crecimiento de raíces laterales que plantas silvestres. Concluimos que AtHB40 y AtHB53 regulan negativamente el desarrollo radicular y la adaptación a salinidad en Arabidopsis thaliana.; Root system development is fundamental for plant adaptation and survival in different environments. Its architecture dynamically responds to abiotic factors such as water availability, nutrients, and salinity. Transcription factors (TF) are key regulators of this process. In this thesis, we studied AtHB40 and its paralogs AtHB53 and AtHB21, belonging to clade VI of the HD-Zip I family in Arabidopsis thaliana, analyzing their functions in root development under optimal conditions and abiotic stress. AtHB40 and AtHB53 are expressed in roots from early developmental stages. AtHB40 is mainly located in the meristematic zone, columella cells, and vascular system of the primary root, while AtHB53 shows greater expression in lateral roots. No expression of AtHB21 was detected in roots. AtHB40 represses primary root growth by indirectly downregulating CYCLINB1.1 and shows cross-regulation with abscisic acid (ABA): ABA induces AtHB40 expression, while AtHB40 negatively regulates ABA levels. Indole-3-acetic acid (IAA) positively regulates AtHB40 in the root tip, where this TF directly controls LAX3 expression. AtHB40 negatively regulates the gravitropic response by controlling auxin transporters. AtHB53 acts as a regulator of AtHB40 in the primary root, mediating its response to IAA. Both TF repress lateral root growth in a hormonally regulated manner. Under saline stress (150 mM NaCl), athb40 and athb53 mutants show higher germination rates, better survival, and greater lateral root growth than wild-type plants. Germination is one of the processes most affected by saline conditions. We conclude that AtHB40 and AtHB53 are negative regulators of root development and adaptation to salinity in Arabidopsis thaliana. Fil: Mora, Catia Celeste. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Wed, 14 May 2025 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/8832 2025-05-14T00:00:00Z https://hdl.handle.net/11185/8822 Tecnología de producción de muteínas hiperglicosiladas de eritropoyetina humana Iturraspe, Francisco La eritropoyetina humana (hEPO) ha sido propuesta como un candidato para el tratamiento de patologías asociadas al Sistema Nervioso Central (SNC). Con el objetivo de priorizar selectivamente las propiedades neurobiológicas de hEPO sin los efectos hematopoyéticos, se diseñaron 12 muteínas de hEPO mediante glicoingeniería por hiperglicosilación, que fueron expresadas en células CHO.K1. De las muteínas, 3 de ellas fueron previamente caracterizadas, obteniéndose resultados muy promisorios. En este estudio, las 9 variantes restantes fueron producidas, purificadas y caracterizadas mediante el análisis de sus propiedades fisicoquímicas y su función biológica in vitro. Las variantes con las mejores características (Mut 45_47 y Mut 104) fueron seleccionadas para ser expresadas en la línea celular HEK-293, con el objetivo de obtener perfiles de glicosilación más similares a la hEPO del SNC y comparar variantes expresadas en los distintos huéspedes celulares en términos de sus funciones biológicas. El análisis comparativo reveló que las variantes de HEK-293 poseen menor masa molecular y contenido de ácido siálico que sus análogos. Los ensayos biológicos in vitro confirmaron el bloqueo de la actividad eritropoyética y la preservación de la función neurobiológica. Aunque las variantes de HEK-293 presentaron propiedades farmacocinéticas menos favorables, no se observaron diferencias significativas entre líneas celulares en la actividad neurobiológica in vivo. Adicionalmente, todas las muteínas demostraron una actividad la molécula de rhEPO original. Los resultados obtenidos en la presente tesis perfilan a la línea celular HEK-293 como una plataforma de producción prometedora para análogos de hEPO con potencial terapéutico en patologías del SNC.; Human erythropoietin (hEPO) has been proposed as a candidate for Central Nervous System (CNS)-associated diseases. Aiming to selectively prioritize the neurobiological properties of hEPO while minimizing the effects associated with its erythropoietic activity, 12 hEPO muteins were previously designed in our laboratory using glycoengineering strategies through hyperglycosylation, which were expressed in CHO.K1 cells. Three of these muteins were previously characterized, yielding very promising results. In this study, the remaining 9 muteins were produced, purified, and characterized by studying their physicochemical properties and in vitro biological activity. The variants exhibiting the most favorable characteristics (Mut 45_47 and Mut 104) were selected for expression in the HEK-293 cell line. The objective was focused on obtaining muteins with a glycosylation profile similar to the hEPO physiologically produced in the CNS, and to compare variants expressed in different host cells in terms of their biological properties. Comparative analysis revealed that HEK-293-derived variants possess lower molecular mass and reduced sialic acid content compared to their counterparts. In vitro assays confirmed the ablation of erythropoietic activity and the preservation of neurobiological function. Although HEK-293 variants exhibited less favorable pharmacokinetic properties, no significant differences in in vivo neurobiological activity were observed between cell lines. Furthermore, all muteins demonstrated superior activity compared to the native rhEPO molecule. The findings of this thesis position the HEK-293 cell line as a promising production platform for hEPO analogs with therapeutic potential in CNS disorders, offering more favorable glycosylation profiles characterized by simpler, potentially less immunogenic glycans. Fil: Iturraspe, Francisco. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Mon, 22 Dec 2025 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/8822 2025-12-22T00:00:00Z