Optical microscopy is a three-dimensional analysis technique. Historically, an important part of the technological developments in microscopy has been aimed at improving the quality and resolution of the images obtained with this kind of instrument. Due to these improvements emerge several types of optical microscopy, among which the wide-field fluorescence microscope stands out, in which both the image formation and treatment have been the main subject of this thesis. According to this, it can be said that this work applies to the field computational imaging. In this sense, the main contribution made in this thesis, in the framework of research, is the development and testing of model-based algorithm for both, the estimation of parameters of the point spread function and the image restoration in this type of instruments. More generally, with this research work is intended to contribute to the methodology for image processing and analysis, with the purpose that they are adequately prepared for morphometric and photometric quantitative analysis.
La microscopia óptica es una técnica de análisis tridimensional. Históricamente, una parte importante de los desarrollos tecnológicos en microscopia se ha orientado a mejorar la calidad y resolución las imágenes obtenidas con estos instrumentos. De estas mejoras surgen varios tipos de microscopia óptica, entre las que se destaca la microscopia de fluorescencia de campo amplio, en la que la formación y el tratamiento de las imágenes han constituido el principal objeto de investigación de esta tesis. De acuerdo a esto, se puede decir que este trabajo aplica al campo de la obtención, o formación, computacional de imágenes. En este sentido, la principal contribución que hace este tesista, en el marco de la investigación, es el desarrollo y pruebas de algoritmos basado en modelos, tanto para la estimación de parámetros de la función de esparcimiento puntual, como para la restauración de imágenes en este tipo de instrumentos. En forma más general, con este trabajo de investigación se aporta a la metodología para análisis y tratamiento de imágenes, con el propósito de que las mismas estén adecuadamente preparadas para análisis cuantitativo morfométrico y fotométrico.