Identificación molecular de especies de Mycoplasma de origen bovino aislados de la cuenca lechera central Argentina

Abstract

Los Mycoplasma pertenecen a la clase Mollicutes y son los microorganismos procariotas autoreplicables más pequeños que existen en la naturaleza. Estos organismos carecen de pared celular y tienen una limitada capacidad biosintética, lo cual hace necesario una estricta dependencia del huésped para su nutrición y refugio. Los Mycoplasma son habitantes de las superficies mucosas respiratoria, urogenital, conjuntival, el tracto gatrointestinal y glándula mamaria, pudiendo causar enfermedad respiratoria, otitis, mastitis, artritis, enfermedad reproductiva, meningitis y conjuntivitis en bovinos. Existen más de once especies de Mycoplasma que se han aislado de bovinos, entre ellas, M. bovis se considera la más prevalente en los EE.UU. y en algunos países de Europa. Por lo tanto, la mayoría de la información actual proviene de reportes de casos y trabajos de investigación realizados sobre esta especie. El objetivo general de este trabajo fue determinar las especies de Mycoplasma que producen infecciones en el ganado bovino en Argentina y desarrollar un método de identificación de las especies prevalentes. Para ello, se realizó una búsqueda del agente infeccioso en muestras de leche de tanque, leche de vaca individual y órganos de terneros. Posteriormente se llevó a cabo la puesta a punto de dos técnicas de MULTIPLEX-PCR para la identificación de M. bovis, M. californicum, M. canadense y M. leacchi. Es la primera vez que se reportan el aislamiento de M. leacchi en Argentina. Este desarrollo facilitara la identificación de las especies de Mycoplasma más frecuentemente aisladas de infecciones en ganado lechero.

Mycoplasma belong to the class Mollicutes and are the smallest self-replicating prokaryotic microorganisms that exist in nature. These organisms lack the cell wall and have a limited biosynthetic capacity, which determines a strict dependence on the host for their nutrition and shelter. Mycoplasma are inhabitants of the respiratory, urogenital, conjunctival mucosal surfaces, gatrointestinal tract and mammary gland; being able to cause respiratory disease, otitis, mastitis, arthritis, reproductive disease, meningitis and conjunctivitis. There are more than eleven species of Mycoplasma that have been isolated from cattle, among them, M. bovis is considered the most prevalent in the USA and in some European countries. Therefore, most of the current information comes from case reports and research work on this species. The general objective of this work was to determine the species of Mycoplasma that produce infections in dairy cattle in Argentina and to develop a method of identification of the most prevalent species. For this purpose, a search of the infectious agent was carried out on samples of bulk tank milk, individual cow's milk and calf organs. Then, the organisms were identified to species level and two techniques of MULTIPLEX-PCR were developed, through which M. bovis, M. californicum, M. canadense and M. leacchi could be identified in a simple way. This is the first report of isolation of M. leacchi from diseased cattle in Argentina. This development will facilitate the characterization of Mycoplasma species most frequently isolated from infections in dairy cattle.