Rol de los esteroles en la determinación de las propiedades estructurales, dinámicas y funcionales de la membrana plasmática en células de insecto. Su relación con la infección con baculovirus

Abstract

La línea celular UFL-AG-286 (Anticarsia gemmatalis), utilizada para la producción in vitro del virus de la poliedrosis nuclear múltiple de Anticarsia gemmatalis (AgMNPV), fue adaptada a tres nuevos medios de cultivo libres de componentes de origen animal, que difieren entre sí en su contenido de esteroles. Las líneas adaptadas presentaron similares cinéticas de proliferación, de consumo de nutrientes y de producción de catabolitos, sólo difirieron en el tamaño. Cuando se ensayó su capacidad para multiplicar AgMNPV, se observó que el virus sólo replicó, y produjo elevados niveles de las dos progenies virales en las células cultivadas en medio con colesterol. En los medios sin colesterol sólo hubo evidencia de efecto citopático en células aisladas. El colesterol resulta esencial para la replicación de AgMNPV en células UFL-AG-286, hay un bloqueo en una etapa temprana del ciclo de replicación, previa a la expresión de los mecanismos de daño celular. Para verificar si la adsorción viral, etapa donde la estructura de la membrana citoplasmática juega un rol central, es modificada por el contenido de esteroles, se realizó una determinación de la cinética de adsorción de AgMNPV sobre todas las variantes adaptadas. Si bien se observaron diferencias en la cinética, posiblemente asociadas a cambios en la estructura de la membrana citoplasmática, el virus fue capaz de adsorberse en todos los cultivos celulares. Por otro lado se evaluó por Resonancia Paramagnética electrónica si la presencia de esteroles y sus diferencias estructurales afectan la fuidez de membrana tanto en membranas modelo como en membranas celulares.