El proyecto tiene como objetivo principal: evaluar la capacidad de protección generada en bovinos inmunizados con una vacuna experimental desarrollada por nuestro grupo de trabajo, frente a un desafío experimental intramamario con aislamientos obtenidos de establecimientos privados de la región. Para eso, en una primera etapa se obtendrán aislamientos de S. aureus de establecimientos lecheros de la región, que presenten problemas recurrentes de mastitis por el microorganismo. Estos aislamientos serán caracterizados genéticamente mediante PFGE para establecer la relación clonal entre ellos y de esta forma seleccionar la cepa prevalente en cada establecimiento. Para evaluar la capacidad protectiva de la vacuna en estudio, en primer lugar, se obtendrán todos los componentes de la vacuna: las proteínas recombinantes ClFA, FnBP, ?-toxina y ?-toxina, y el adyuvante: liposomas catiónicos suplementados con oligonucleótidos CpG no metilados. Posteriormente, un grupo de vaquillonas Holstein será inmunizado con la formulación obtenida y, luego del parto, se realizará el desafío mediante inoculación intramamaria de las cepas seleccionadas en la primera etapa. Los animales serán controlados periódicamente por exploración clínica y se analizará la presencia de la IIM mediante análisis bacteriológico de muestras de leche obtenidas hasta el día 21 post-desafío. En estas muestras también se realizará el RCS. Finalizados los muestreos, se procederá al tratamiento de los animales infectados. Simultáneamente, se evaluará la respuesta inmune inducida por la vacuna mediante la detección de anticuerpos específicos contra las cuatro proteínas, en sangre y en leche. Se espera que el plan de inmunización aplicado genere una respuesta inmune capaz de proteger a los animales de la infección, independientemente de la cepa utilizada para realizar el desafío. Esto permitiría sugerir que la vacuna diseñada resulta eficaz para las cepas circulantes en la región y, por lo tanto, puede ofrecerse como estrategia para el control de las IIM por S. aureus.
The main objective of the project is to evaluate the protection capacity generated in cattle immunized with an experimental vaccine developed by our group, against an experimental intramammary challenge with isolates obtained from private dairy herds in the region. Firstly, S. aureus isolates will be obtained from dairy herds in the region, which present recurrent problems of mastitis due to the microorganism. These isolates will be genetically characterized by PFGE to establish the clonal relationship between them, and thus select the prevalent strain in each establishment. To evaluate the protective capacity of the vaccine under study, at first, all the components of the vaccine will be obtained: the recombinant proteins ClFA, FnBP, ?-toxin and ?-toxin, and the adjuvant: cationic liposomes supplemented with non-metilated CpG oligonucleotides. Subsequently, a group of Holstein heifers will be immunized with the formulation and, after calving, the challenge will be carried out by intramammary inoculation of the selected strains in the first stage. The animals will be controlled periodically by clinical examination and the presence of IIM will be analyzed by bacteriological analysis of milk samples obtained up to day 21 post-challenge. SCC will also be performed on these samples. Once the sampling is finished, the infected animals will be treated. Simultaneously, the immune response induced by the vaccine will be evaluated by detecting specific antibodies against the four proteins in blood and milk. The immunization scheme is expected to generate an immune response capable of protecting the animals from infection, regardless of the strain used to carry out the challenge. This would suggest that the designed vaccine is efficient for the strains circulating in the region and, therefore, can be offered as a strategy for the control of IIM due to S. aureus.
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