¿La exposición prenatal a endosulfán afecta el patrón molecular, celular y tisular de desarrollo del oviducto del yacaré overo (Caiman latirostris)?

Abstract

La formación de glándulas (adenogénesis) es un proceso que caracteriza el desarrollo y diferenciación posnatal del oviducto del yacaré overo (Caiman latirostris). Este proceso puede verse alterado por exposición a agroquímicos hormonalmente activos, como endosulfán (END). En este trabajo de tesis evaluamos la expresión de moléculas involucradas en la diferenciación y migración de células epiteliales, y de moléculas asociadas a la remodelación del estroma subepitelial, procesos necesarios para una correcta adenogénesis, y los efectos de la exposición in ovo a END sobre estas moléculas. La exposición a END alteró el score histomorfológico, la altura del epitelio luminal, el espesor de la región del estroma subepitelial ocupada por colágeno pobremente organizado, la expresión de beta-catenina en las glándulas, la relación de proteínas de estirpe contráctil (desmina y alfa-actina), la expresión de receptor de andrógenos en el epitelio oviductal, la expresión de genes involucrados en la adenogénesis (CTNNB1, MMP2, MMP9 y TIMP1), y la relación entre la expresión de defensinas y los niveles circulantes de estradiol. Por otro lado, optimizamos un ensayo basado en levaduras recombinantes para evaluar la actividad hormonal y anti-hormonal en muestras complejas. El método se encuentra optimizado y listo para evaluar muestras de agua provenientes de sitios de anidación de C. latirostris. Los resultados de este trabajo alertan sobre los efectos que tiene la exposición a contaminantes con actividad hormonal sobre la fauna silvestre, los cuales podrían derivar fertilidad reducida y alteraciones en la dinámica poblacional.

The formation of new glands (adenogenesis) is a process that characterizes the growth and postnatal differentiation of the oviduct of the broad-snouted caiman (Caiman latirostris). This process can be altered by exposure to hormonally active agrochemicals, such as endosulfan (END). In this thesis project we evaluated the expression of molecules involved in the differentiation and invagination of epithelial cells, and the expression of molecules associated to subepithelial stroma remodeling, and the effects of exposure to END on these molecules. Exposure to END altered the histomorphological score, the luminal epithelial height, the width of subepithelial stromal region with lowly birrefringent collagen fibers, the protein expression of beta-catenin in the glans, the desmin-alfa-actin ratio, the expression of androgen receptor in the epithelium, the expression of genes encoding for proteins involved in adenogenesis (CTNNB1, MMP2, MMP9 y TIMP1), and the correlation coefficient between the expression of defensins and circulating estradiol levels. On the other hand, we optimized a bioassay based on recombinant yeast to evaluate hormonal activity in complex samples. The method is currenlty optimized and prepared to assess hormonal activity in water samples collected from C. latirostris nesting grounds. Results from this thesis alert on the effects that exposure to hormonally active contaminants have on wildlife fauna, which could lead to decreased fertility and alteration in population dynamics.