Enfermedad Celíaca: Aspectos Inmunoquícos y Diagnóstico

Abstract

La enfermedad celíaca se caracteriza por daño a la mucosa de intestino delgado y mala absorción de nutrientes, en individuos genéticamente susceptibles, en respuesta a la ingestión de ciertas proteínas presentes en gluten de trigo y cereales relacionados (cebada, centeno y avena). La susceptibilidad genética está asociada a los alelos que codifican para el heterodímero HLAII DQ2/ DQ8. Los objetivos principales de esta tesis fueron desarrollar herramientas de diagnóstico inmunoquímico sensibles y específicas tanto para la detección de gliadinas en alimentos destinados a celíacos, como para el diagnóstico de la patología. Hasta 1997 los marcadores serológicos eran los anticuerpos IgA e IgG anti-gliadinas y los autoanticuerpos antiendomisio. A partir de esa fecha, la identificación de la enzima transglutaminasa de tejido como el blanco principal de los anticuerpos antiendomisio, condujo a un gran avance en el conocimiento de la patología a nivel molecular. Fue posible vincular la predisposición genética con la acción de esta enzima sobre las gliadinas y el desorden inmunológico. Sobre esa base desarrollamos ensayos de ELISA para detectar anticuerpos, utilizando alternativamente como antígenos de captura transglutaminasa o péptidos de gliadina, en sus secuencias nativas y selectivamente deamidadas. Evaluados sobre un panel de sueros de individuos sanos y celíacos, los tres antígenos resultaron específicos y sensibles. Consideramos que la especificidad de la respuesta de los anticuerpos de enfermos celíacos frente los péptidos de gliadina selectivamente deamidados, es el hallazgo más relevante de este trabajo, para su aplicación al diagnóstico serológico de la patología.

Celiac disease is characterized by small-intestinal mucosal injury and nutrient malabsorption in genetically susceptible individuals in response to the dietary ingestion of wheat gluten and similar proteins in barley, rye and oat. Genetic susceptibility is associated with alleles encoding HLA II heterodimers DQ2 / DQ8. The main objectives of this thesis were to develop sensitive and specific immunochemical tools, both for gliadin detection in foods destined to celiac patients, and also for the diagnosis of the pathology. Until 1997 main serological markers were IgA and IgG anti-gliadin antibodies and anti-endomysial auto-antibodies. Since that date, identification of the enzyme tissue transglutaminase as the main antigen target of antiendomysial antibodies, achieved to a great advance in the knowledge of the pathology at the molecular level. It was possible to correlate the genetic predisposition with the action of the enzyme on the gliadins and the immunological disorder. On this base we developed ELISA assays to detect antibodies, using alternatively as capture antigens, tissue transglutaminase or gliadin peptides, in their native and selectively deamidated sequences. Evaluated over a panel of healthy and celiac individual the three antigens resulted specific and sensitive .We consider that the specificity of the response of celiac patients antibodies against the selectively deamidated peptides, is the most relevant finding of this work, in order to be applied to the laboratory diagnosis of the pathology.