Evaluation of the germinative behaviour of three native species with ornamental potencial in the centre-north of Santa Fe.

The native flora has an enormous landscaping potential not fully explored yet. In the present work, aspects related to seeds and germination behavior of three native plant species from central-northern Santa Fe with ornamental potential, prioritized for their introduction to nursery production in the framework of the actions of the Program for Documentation, Conservation and Valuation of Native Flora (PRODOCOVA), have been studied. The studied species were “Sangre drago” Croton urucurana Baill, “Horquetero” Tabernaemontana catharinensis A. DC., and “Ojo de muñeca” Paullinia elegans Cambess. For C. urucurana alternating temperatures of 20-30 °C were found as optimal temperature, while for P. elegans and T. catharinensis, constant temperature at 25 °C determined the highest percentage of germination. Additionally, the initial and fi nal count of the germination percentage were determined for each species. Finally, it was also noted that seeds of P. elegans are recalcitrant. These results provide the basis for the introduction to cultivation of the studied species.

Key words: Landscaping, seeds, nursery, germination rate.

INTRODUCCIÓN mano sobre las plantas, animales y hábitats

naturales, nuestras acciones pueden hacer

^{Las plantas son parte fundamental del} una gran diferencia si las plantas son parte^{sostén de los ecosistemas verdes de la Tie-}de la civilización ecológica para el futuro.rra, pero también son esenciales para la _{Es de suma importancia el poder estudiar}supervivencia humana. Es conocido que

las y utilizarlas responsablemente, tantolas plantas proporcionan la mayor parte de _{como científicos, así como miembros de las}

^{los alimentos que consumimos (directa o} sociedades humanas (Carreras et al., 2003; indirectamente), nuestras medicinas, ropa, _{Rendón Correa y Fernández Nava, 2007;} edificios y hasta el aire que respiramos; _{Knapp, 2017).} también embellecen nuestra vida cotidiana. _{La producción mundial de plantas or-} El aprovechamiento ornamental de la flo

namentales y sus industrias subsidiarias, ra nativa se limita a pocas especies, si se _{generan anualmente un valor agregado apro}

^{compara con la cantidad y diversidad de} ximado de entre 250 a 400 mil millones de especies silvestres que podrían incorporar-_{dólares, alrededor del 0,5% del producto}

^{se al cultivo. Características como forma,} bruto mundial. Para Argentina se estima que ^{color del follaje o una fl oración vistosa,} el valor bruto de la producción está entre 220hacen de las plantas nativas un elemento

a 240 millones de dólares (Botto y Mata,^{potencialmente valioso para jardinería y} 2014). En cuanto a la diversidad biológica,paisajismo, lo que justifica el estudio de sus _{los recursos genéticos nativos y los merca}

^{probabilidades de propagación y difusión.} dos globales asociados a ello, forman la base^{Actualmente, con el creciente impacto hu-}de una proporción significativa de la actividad económica mundial. Una estimación de las ventas de los mercados globales anuales para el área de los productos hortícolas ornamentales derivados completamente de recursos genéticos se encuentra entre 16 y 19 billones de dólares (Morisigue et al., 2012).

La viverización de especies nativas con fines paisajísticos es una temática que ha adquirido relevancia en los últimos años. En este sentido, se ha conformado en 2016 la Red de Viveros de Plantas Nativas (REVINA) que reúne diferentes actores involucrados en la identificación, valoración y producción de plantas nativas. Adicionalmente, en el marco de las acciones del Pro-grama de Documentación, Conservación y Valoración de la Flora Nativa (PRODOCOVA), que se desarrolla en la FCA-UNL desde el año 2012, se han identifi cado y colectado especies nativas con diferentes potencialidades agronómicas en las que se incluyen especies con valor ornamental. Estas acciones contribuyen a la conservación y a la valoración de la fl ora autóctona.

La propuesta que se presenta, se enmarca en un contexto internacional en el que el paisajismo tiende a integrar las áreas naturales a las urbanas, resaltando el valor de las especies silvestres con la finalidad de recuperar áreas degradadas, aprovechar los servicios ambientales que ofrecen (p.e. polinización), mantener la identidad del paisaje natural y conservar germoplasma autóctono.

Para este trabajo se seleccionaron para su estudio tres especies nativas, “Sangre drago” Croton urucurana Baill. (Euforbiaceae); “Horquetero” Tabernaemontana catharinensis A. DC. (Apocynaceae) y “Ojo de muñeca” Paullinia elegans Cambess. (Sapindaceae), dado sus múltiples usos potenciales, incluido el ornamental (para más detalles del valor ornamental de las especies en estudio se puede consultar el Banco de Imágenes Irupé de la FCA; https://www. fca.unl.edu.ar/prodocova/IRUPE).

N. Ghío et al.

Aires, y además en Uruguay. Es frecuente en los bordes y claros de las selvas siendo su límite austral el norte de Santa Fe y Entre Ríos (Biloni, 1990). Pionera, frecuente en los matorrales y bosques secundarios del Chaco Oriental, se establece rápidamente después de aprovechamientos forestales que alteran el bosque alto, con alto poder de brotación a partir de raíces. Florece desde noviembre a enero y fructifica de febrero a abril (Gimenez y Moglia 2003). Su potencialidad como ornamental radica en que es un árbol de porte medio, de buen follaje, siempre verde, floración vistosa y fácil propagación. Estudios realizados por Afonso (2016), determinaron temperaturas óptimas de germinación a 25 y 30 °C en poblaciones de T. catharinensis nativas del rio Grande do Sul, independientemente del régimen de luz. Adicionalmente, demostraron que las semillas poseen un comportamiento ortodoxo.

Ojo de muñeca (Paullinia elegans Cambess.), es una planta de hábito tipo liana, ampliamente distribuida desde Colombia, Bolivia, Paraguay, Uruguay hasta el NE de Argentina, donde crece en las provincias de Chaco, Formosa, Misiones, noroeste de Santa Fe, Corrientes y Entre Ríos. Vegeta en el borde de la selva marginal, pero también aparece en la vegetación secundaria. Florece en octubre-junio, con frutos en diciembre-agosto, aunque son más abundantes en el verano (Pensiero y De la Peña, 1999; Verde Chaco, 2011). Lo vistoso de esta especie son los frutos rojizos que, a la madurez, se abren dejando a la vista las semillas negruzcas recubiertas de un arilo blanquecino, que da el aspecto a un ojo de muñeca, tal como se la conoce vulgarmente a la especie.

Resumiendo, la evidencia relacionada al comportamiento germinativo de las especies establece que, en C. urucurana son necesarios tratamientos pre-germinativos para promover la germinación de las semillas, en particular, semillas color gris las que, además, son ortodoxas. En T. catharinensis hay evidencia de que sus semillas son ortodoxas y que germinan sin necesidad de tratamientos pre-germinativos. En P. elegans, se desconoce el comportamiento de sus semillas al almacenamiento a baja humedad y temperatura, aunque experimentos preliminares indican que se tratarían de semillas de comportamiento recalcitrante, y se conoce que no son necesarios tratamientos pre-germinativos. Aunque se han reportado temperaturas óptimas de germinación para las especies en estudio, esa información no pertenece a poblaciones nativas de la región santafesina, incluso de Argentina.

Por lo antes mencionado, en el presente trabajo se evaluó la temperatura óptima de germinación de poblaciones nativas del centro - norte santafesino de Croton urucurana, Tabernaemontana catharinensis y Paullinia elegans. Adicionalmente, se ensayaron diferentes tratamientos pre-germinativos en C. urucurana y se evaluó el comportamiento al almacenamiento a baja humedad en semillas de P. elegans, información de suma importancia para la introducción de dichas especies al mercado ornamental.

Material vegetal

Las colectas fueron realizadas por los responsables del Banco de Germoplasma “Ing. Agr. José M. Alonso” y docentes de la Cátedra de Cultivos Intensivos de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional del Litoral, en diferentes áreas de su distribución natural en los departamentos La Capital, Juan de Garay y San Javier, de la provincia de Santa Fe, en la zona denominada Albardón Costero, perteneciente a la región fitogeográfica del Delta e islas del Paraná (Biasatti et al, 2016) (Figura 1). Se colectaron frutos de tres poblaciones de C. urucurana, en el Dpto. La Capital, distrito Arroyo Leyes, a lo largo de un corredor de 4 km; dos poblaciones de T. catharinensis, en el Dpto. Garay, en los alrededores de la localidad de Cayastá; y cinco poblaciones de P. elegans en el Dpto San Javier, a lo largo de la ruta provincial Nº 1 y la costa del río San Javier, entre el paraje Los Jacintos y la localidad de Alejandra. Todas las plantas de las poblaciones colectadas fueron georreferenciadas, incluyendo material para el Herbario Arturo E. Ragonese (“SF”). El trabajo de selección y georreferenciación fue realizado, en primera instancia, en el marco de misiones de colecta del PRODOCOVA y luego durante diversos viajes de prospección durante los años 2017 y 2018 realizados por la Cátedra de Cultivos Intensivos, en el marco del Proyecto CAI+D Orientado 2016. Los viajes de colectas fueron realizados en temporada otoñal (marzo – abril), ya que es la época ideal para la cosecha de semillas de estas especies. Cabe aclarar que los meses de marzo y abril para ambos años de colecta, coincidieron con importantes

Figura 1: Mapa de la provincia de Santa Fe, donde se observa la ubicación geográfica de las colectas realizadas para cada una de las especies en estudio Figure 1: Map of the province of Santa Fe, showing the geographical location of the collections made for each of the species under study

N. Ghío et al.

precipitaciones y altas temperaturas. Esto incidió en la calidad de la semilla colectada, especialmente para el caso de P. elegans y de T. catharinensis que, al tener frutos carnosos, estos estaban muy atacados por larvas de insectos.

Los frutos de cada una de las especies en estudio fueron procesados luego de la colecta para separar las semillas. En el caso de C. urucurana, este posee un fruto seco indehiscente denominado esquizocarpo. Estos fueron trillados por fricción para liberar las semillas; adicionalmente, se seleccionaron semillas de color gris las que, según Scalon et al. (2012), lo cual fue comprobado con ensayos preliminares en nuestro grupo de trabajo, son las únicas con capacidad de germinar. Los frutos de

P. elegans (cápsulas carnosas) se abren a la madurez, dejando libres las semillas, las que poseen un arilo carnoso blanquecino que fue removido con papel absorbente ya que posee un alto contenido de carbohidratos y favorece la proliferación hongos. Por otro lado, T. catharinensis posee a la madurez un fruto seco pluriseminado (folículo), dehiscente, cuyas semillas poseen un arilo carnoso y jugoso que fue retirado con papel absorbente y puesto a secar en ambiente de baja humedad para evitar la proliferación de hongos. En todos los casos se eliminaron semillas vanas, malformadas, rotas o atacadas por hongos. Para cada una de las especies, se trabajó con muestras masales de semillas (mezcla en iguales proporciones de semillas de las poblaciones colectadas), se determinó el peso de 100 semillas (g) y se evaluó el comportamiento germinativo (Hartmann et al., 2002).

Ensayos de germinación

Croton urucurana: Se ensayaron diferentes tratamientos pre-germinativos combinados con diferentes temperaturas de germinación. Los tratamientos pre-germinativos consistieron en: 1) inmersión en agua durante 2 horas; 2) inmersión en agua durante 12 horas; 3) inmersión en solución con ácido giberélico [(GA) 200 mg.L-1] durante 2 horas; 4) inmersión en solución con GA (200 mg.L-1) durante 12 horas; 5) control (sin tratamiento pre-germinativo). Luego de realizados los diferentes tratamientos pre-germinativos, se incubaron las semillas a diferentes temperaturas: 1) constante a 25 °C, 2) constante a 30°C y 3) alternancia de temperaturas 2030 °C (8/16 horas). De esta manera quedaron definidos 15 tratamientos derivados de la combinación de los cinco tratamientos pre-germinativos y las tres temperaturas de germinación. Para cada tratamiento, se utilizaron cuatro repeticiones, de 25 semillas dispuestas en cajas de Petri (unidad experimental). Se efectuaron recuentos periódicos durante 30 días, para establecer la fecha óptima que defina el porcentaje de germinación inicial y final. Adicionalmente, se tomó una muestra de 50 semillas a la que se le efectuó la prueba de viabilidad a través del test de Tetrazolio (Moore, 1985).

Paullinia elegans: se evaluó el comportamiento germinativo a diferentes temperaturas contantes: 1) 20 °C, 2) 25 °C y 3) 30 °C, que definieron los tratamientos. Se efectuaron recuentos periódicos durante 30 días, para establecer la fecha óptima que defina el porcentaje de germinación inicial y final. Para esta evaluación se utilizaron semillas procesadas inmediatamente después de la colecta, ya que estudios preliminares (datos no publicados) determinaron un posible comportamiento recalcitrante de sus semillas.

El principal determinante del comportamiento recalcitrante de las semillas es la pérdida de viabilidad ante la desecación

o disminución del contenido hídrico de las semillas, por debajo de 20 % (Willian 1991). Para determinar el comportamiento al almacenamiento en P. elegans, se tomó una muestra de 50 semillas procesadas inmediatamente después de la recolección y se determinó el porcentaje de humedad. Para ello, se registró el peso inicial de la muestra (PI) (g), con balanza de precisión (0.0001 g), se llevó luego a estufa a 100 ºC hasta peso constante para determinar peso seco de la muestra (PS) (gr) y se estimó el porcentaje de humedad (%H) [%H = (PHPS)/PH]. Parte de las semillas recientemente colectadas (50 semillas), fueron evaluadas mediante el test de Tetrazolio (Moore, 1985), para determinar la viabilidad. Un lote de 100 semillas se dividió en cuatro muestras (25 semillas por muestra) y se colocaron en cajas herméticas con sílica gel en su interior, para favorecer la pérdida de humedad. Se efectuó un registro constante de la pérdida de humedad y se pusieron a germinar las muestras de semillas en la medida que alcanzaron 20, 15, 10 y 5 % de contenido de agua, a la temperatura óptima de germinación hallada en el experimento anterior. Adicionalmente, a cada muestra de semilla, con diferente grado de humedad, se le efectuó la prueba de viabilidad con Tetrazolio. Las semillas estaban muy dañadas por insectos, lo que condicionó el tamaño de las muestras.

Tabernaemontana catharinensis: se evaluaron tres tratamientos de temperaturas constantes de incubación: 1) 20 °C, 2) 25 °C y 3) 30 °C. Se efectuaron recuentos periódicos durante 30 días, para establecer la fecha óptima que definió el porcentaje de germinación inicial y final. Para la evaluación del efecto de la temperatura en el comportamiento germinativo se procedió del mismo modo que en P. elegans.

Análisis de datos

Se realizó un Análisis de la Varianza (p<0,05), para cada especie, para evaluar el porcentaje final de germinación (PFG) y el índice de velocidad de emergencia [(IVE), Maguire (1962)] a las diferentes temperaturas de germinación evaluadas. Adicionalmente, para C. urucurana, se evaluó el efecto de los tratamientos pre-germinativos como otro factor, además de la interacción con las temperaturas de germinación. Previo a los análisis se corroboró la distribución normal de los errores (test de Shapiro-Wilks modificado) y homogeneidad de varianzas. Las diferencias de medias se evaluaron a través del test Tukey (p<0.05). Para todos los casos se utilizó el paquete estadístico InfoStat (Di Rienzo et al., 2018).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En Croton urucurana, el test de viabilidad determinó un 68,8 % de semillas viables al momento de la evaluación. La Figura 2 muestra el porcentaje de germinación acumulada, en términos de semillas viables, en las diferentes temperaturas de germinación para los diferentes tratamientos pre-germinativos.

Se registró un mejor comportamiento en las semillas incubadas en temperaturas alternantes (20-30 °C), independientemente de los tratamientos pre-germinativos. El inicio de la germinación se presentó a los 7-8 días de la incubación. El número de semillas germinadas aumentó hasta el día 16-17 y luego se estabilizó hasta el fi nal del periodo de la evaluación. A los 10 días de

CONCLUSIONES

AGRADECIMIENTOS

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