Desarrollo de una estrategia inmunomoduladora para el control de la infección generada por Trypanosoma cruzi

Abstract

La enfermedad de Chagas, causada por el protozoario Trypanosoma cruzi (T. cruzi), representa un grave problema de salud en América Latina. Actualmente no existe una vacuna resultando en una alternativa adecuada al tratamiento. En este trabajo se evaluaron distintos antígenos del T. cruzi. Se diseñó un modelo de infección, utilizando ratones Balb/c inmunizados con tres dosis de cada antígeno formulados con adyuvante de Freund y finalmente se infectó con parásitos de la cepa Tulahuen clon 2. Se midió respuesta humoral, parasitemia y sobreviva como marcadores principales de protección. De las proteínas evaluadas: FRA, Tc3, TS, Tc6, TXN y CPX, la TS presentó mayor protección y en menor medida la Tc3. Seleccionamos a la TS para la evaluación de adyuvantes de nueva generación: el oligonucleótido no CpG, IMT505 (IMT) y el ISCOMATRIX (IMX), que está compuesto por fosfolípidos, colesterol y saponina. La formulación TS-IMX presentó mayor protección obteniéndose un 100 % de sobrevida. Una evaluación más extensa de la formulación TS-IMX generó una respuesta celular con producción de linfocitos T CD8+IFN-+, altos títulos de IgG2a, baja parasitemia y carga parasitaria en tejido cardiaco, así como una muy baja miocarditis y fibrosis en comparación con el grupo control tanto en el estadio agudo como en el crónico. Este último resultado es destacable ya que la miocarditis es la principal manifestación patológica de la enfermedad de Chagas. Los resultados obtenidos indican que es factible el desarrollo de una vacuna a subunidades formulada con un adyuvante de probada seguridad para su uso en humanos.

Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), represents a serious health problem in Latin America. Currently there is no vaccine resulting in an adequate alternative for treatment. In this work, we assessed different antigens of T. cruzi in an infection model with T. cruzi. We used Balb / c mice immunized with three doses of each antigen formulated with Freund's adjuvant and finally infected with parasites of the Tulahuen clone 2 strain. We measured Humoral response, parasitaemia and survival as main protection markers. The antigens that were evaluate, FRA, Tc3, TS, Tc6, TXN and CPX, only the TS presented greater protection. We selected the TS for the evaluation of new generation adjuvants, as the oligonucleotide no-CpG, the IMT505 (IMT) and the ISCOMATRIX (IMX), which is composed of phospholipids, cholesterol and saponin. The first result showed that TS-IMX formulation presented greater protection, obtaining a 100% survival. An extensive assessment of the TS-IMX formulation generated a cellular response with production of lymphocytes T +CD8 +IFN-y, high titers of IgG2a, low parasitaemia and parasitic load in cardiac tissue. A very low myocarditis and fibrosis in comparison with the control group in both the acute and chronic stages. This last result is remarkable since myocarditis is the main pathological manifestation of Chagas disease. The results obtained indicate that the development of a subunit vaccine formulated with an adjuvant of proven safety for its use in humans is feasible.