Infección por Helicobacter pylori: estudio de factores asociados a la bacteria y al huésped con impacato en el diagnóstico, pronóstico y tratamiento de la enfermedad.

Abstract

Helicobacter pylori (H. pylori) es un agente etiológico causante de gastritis crónica, atrofia gástrica, ulceras duodenales y de relevancia en el desarrollo de cáncer gástrico. Las mayores lesiones podrían deberse a factores de virulencia específicos de la bacteria (productos de genes cagA, vacA, babaA2 y OipA entre otros) y a polimorfismos en genes de citoquinas así como en enzimas relacionadas a procesos de metilación. Se estima que el 50% de la población mundial se encuentra colonizada con esta bacteria. La epidemiologia mundial del cáncer gástrico indica que, con datos actualizados a 2018, ocupa el 5° lugar en el total de canceres diagnosticados y el 3° en relación a mortalidad debida a cáncer. Por esto, y dada la estrecha relación entre la infección por H. pylori y el cáncer gástrico, identificar pacientes que se encuentren en mayor riesgo se transforma en una prioridad. Actualmente, los tratamientos mas usados incluyen claritromicina ( o levofloxacina), amoxicilina y un inhibidor de la bomba de protones. La eficacia de estos tratamientos a disminuido drásticamente debido principalmente por el aumento de resistencia a claritromicina (y a levoflocacina). En Argentina hay pocos reportes acerca de la resistencia a Claritromicina y a Levofoxacina pero la evidencia actual indica que tales resistencias están en incremento. Sobre esta base, el monitoreo de la prevalencia de la resistencia a antibióticos se convierte en un elemento significativo para la práctica clínica. Objetivos: a)genotipificar H. Pylori en pacientes de nuestra región, por la presencia de los factores de virulencia CagA, VacA, babA2 y OipA; b)detectar mecanismos de resistencia a claritromicina y levofloxacina en H. pylori identificados en nuestra región; c) estudiar la presencia de polimorfismos en genes de citoquinas (IL-1, IL-6 a IL-8) y de MTHFR en el huesped; d) correlacionar factores de la bacteria y aquellos intrínsecos al huésped con las alteraciones en la mucosa gástrica. Material y métodos. Muestras: biopsias de tejido gástrico de pacientes sintomáticos. Análisis molecular: La detección molecular de H. pylori se realizará por una PCR en tiempo real con el gen hsp60 como blanco de amplificación. La presencia de los genes cagA, vacA, babA2 y OipA se detectará por PCRs de punto final. La detección de mutaciones responsables de resistencia a antibióticos asi como la presencia de SNPs en genes de IL-6, IL-8 y de MTHFR en los pacientes se evaluará por PCR-RFLP y/o por ASP-PCR.

Helicobacter pylori (H.pylori) is an etiological agent for gastroduodenal diseases ranging from dyspepsia, chronic gastritis, gastric atrophy and peptic ulcer disease to gastric adenocarcinoma. These different clinical presentations may be due to specific virulence factors of the bacterium (among others, cagA, vacA, babA and oipA genes) as well as intrinsic host factors (e.g DNA polymorphisms in genes coding interleuquins and/or methylation-related enzymes). H. pylori colonizes the gastric mucosa in 50% of the human population worldwide with the highest rates observed in developing countries. Currently, the epidemiology of cancer shows that gastric cancer reaches the 5th place among all diagnosed cancers around the world in 2018 and the 3th position if cancer mortality is considered. Taking this into account, and owing to the close relation between H. pylori infection and gastric cancer, identifying high risk patients (by the analysis of bacterial and host biomarkers) becomes a priority. Nowadays, the most widely used treatment regimens include the standard triple therapy, which comprises two out of three antibiotics, clarithromycin (or levofloxacin) and amoxicillin (or metronidazole), together with a proton pump inhibitor (PPI). The efficacy of this therapy has dramatically declined, mainly due to increasing clarithromycin resistance rates observed in many regions of the world. In Argentina there are few reports about clarithromycin resistance; however, current evidence indicates that such resistance is increasing. The same scenario can be observed with levofloxacin. Aims: a) to genotype H.pylori in patients from our region by the presence of virulence factors cagA, vacA, babA2 y OipA; b) to detect mechanisms of resistance to clarithromicin as well as levofloxacina in H, pylori identified in our region; c) to study polymorphisms in citokines genes as well as in the mthfr gene in patients infected with H. pylori and d) to analyze the relation between bacterial virulence factors and host factors with changes in the gastric mucosa. Material and methods. Samples: gastric biopsies from symptomatic patients. Molecular analysis: H.pylori will be detected by Real Time PCR using the hsp60 gene as amplification target. The presence of cagA, vacA, babA2 and oipA genes will be analyzed by conventional PCR. IL-6, IL-8 and mthfr SNPs will be identified by PCR-RFLP. ASP-PCR will be used to analyze clarithromycin and levofloxacin resistance.