Amplicones y partículas replicantes defectivas derivadas del virus Herpes simplex tipo 1 como vectores transgénicos de patógenos de humanos y animales

Abstract

Los vectores basados en el virus Herpes simplex tipo 1 (HSV-1) se presentan como un sistema de gran potencial para terapia génica y en vacunas de última generación. En el presente trabajo, se construyeron y evaluaron distintos tipos de vectores basados en HSV-1, como candidatos para el establecimiento de una plataforma de vacunas de nueva generación contra diferentes patógenos humanos y animales, a través de la expresión de antígenos pertenecientes a Rotavirus (RV) grupo A y grupo C, la rickettsia Anaplasma marginale, y el Virus de la Fiebre Aftosa. Por medio de transducción o infección de cultivos celulares con estos vectores, se comprobó la expresión de los antígenos heterólogos en los diferentes sistemas. Se seleccionaron algunos de los vectores para realizar una prueba de concepto sobre su uso como vacunas, aplicando diferentes esquemas de inmunización en ratones. Los resultados indicaron que los vectores herpéticos fueron capaces de generar una respuesta inmune específica. En el caso de los antígenos de RV analizados, se estudió el desarrollo de una respuesta inmune humoral, y en el caso del vector que codifica para MSP5 de A. marginale, se determinó una respuesta inmune principalmente celular, la cual se balanceó hacia una respuesta múltiple luego del suministro de un refuerzo con el antígeno proteico adyuvado. Teniendo en cuenta los resultados obtenidos en el presente trabajo, se demuestra que vectores basados en HSV-1 son candidatos atractivos para el desarrollo de vacunas genéticas de nueva generación, dirigidas contra patógenos virales y bacterianos que afectan a humanos y animales.

Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) based vectors have shown a great potential for gene therapy and are considered promising vehicles to deliver heterologous antigens for new generation vaccines. In the present work, HSV-1 viral vectors have been evaluated for the assessment as a vaccine vector platform against group A and group C rotavirus (RV), the rickettsia Anaplasma marginale, and Foot-and-mouth disease virus (FMDV) infections. Defective herpesviruses and amplicon vectors that express, individually or co-expressing, group A RV proteins were developed. Additionally, amplicon vectors which express VP6 protein from a non-cultivable group C RV strain or the surface antigen MSP5 of A. marginale were constructed. A display vector, which expresses in its surface the FMDV-RGD epitope of the structural protein VP1, was generated. Stocks of the selected amplicon vectors, expressing group A RV VP4 and VP7, or A. marginale MSP5 were produced to carry out different immunization schedules in Balb/c mice, to assess the specific immune response elicited, in the absence of adjuvants. The results showed an induction of specific immune responses in the vaccinated animals. The development of specific humoral immune response was obtained with amplicon vectors expressing RV proteins. A cellular immune response was mainly observed after inoculation of the A. marginale MSP5 amplicon vector, which shifted to a multiple immune response when boosted with the homologous adjuvanted recombinant protein. The results presented in this work indicate that HSV-1 amplicon vectors are attractive candidates for the development of safe genetic vaccines against human and animal pathogen infections.