Uso de Chelex-100 para el diagnóstico molecular de cinco patógenos de animales

  • Mariela Luján TOMAZIC IPVET, INTA-CONICET https://orcid.org/0000-0003-0408-8356
  • Micaela HAMER Instituto de Patobiología, IPVET, INTA-CONICET
  • Carla Paola BUSTOS Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Veterinarias (FCV), Cátedra de Enfermedades Infecciosas
  • Matías ARREGUI Instituto de Patobiología, IPVET, INTA-CONICET
  • Mariano ASCENCIO Instituto de Patobiología, IPVET, INTA-CONICET
  • Vanina SARAULLO IPVET, INTA-CONICET
  • Olivia WATANABE Instituto de Patobiología, IPVET, INTA-CONICET
  • Bibiana BRIHUEGA Instituto de Patobiología, IPVET, INTA-CONICET
  • Anabel Elisa RODRIGUEZ Instituto de Patobiología, IPVET, INTA-CONICET
  • Sylvia GRUNE-LOFFLER
Palabras clave: Veterinaria, Diagnóstico, ADN, Chelex-100, PCR
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Resumen

Las técnicas moleculares han contribuido a mejorar el diagnóstico veterinario tradicional y la extracción de ácidos nucleicos es determinante. El objetivo de este trabajo fue comparar el método de extracción de ADN Chelex-100 (M1) con papel Whatman (M2), fenol-cloroformo (M3) o kits comerciales (M4), y determinar un método sensible y de bajo costo para el diagnóstico de patógenos de animales económica o zoonóticamente relevantes y que reciben poca atención. A partir de orina, órganos, semen, sangre y mucosa intestinal se extrajo el ADN de las bacterias Leptospira interrogans serovar Pomona Pomona (con M1 y M2), Brucella melitensis (con M1, M3 y M4), Salmonella ser. Abortusequi (M1 y M4), y de los parásitos Leishmania spp. (M1, M3 y M4) y Eimeria spp. (M1 y M3), respectivamente. La sensibilidad de los protocolos fue analizada por PCR. El método M1 demostró una sensibilidad similar para S. Abortusequi, Leishmania spp. y Eimeria spp., siendo mejor para L. interrogans y levemente menor para B. melitensis. Por primera vez se usó exitosamente en estos patógenos veterinarios un método simple y económico para extraer ADN, especialmente importante en laboratorios de bajos recursos económicos, contribuyendo al diagnóstico de leptospirosis, brucelosis, leishmaniasis y coccidiosis, así como también a la epidemiología molecular de salmonelosis en muestras de semen de caballos.

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Citas

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Publicado
2021-04-06
Cómo citar
TOMAZICM., HAMERM., BUSTOSC., ARREGUIM., ASCENCIOM., SARAULLOV., WATANABEO., BRIHUEGAB., RODRIGUEZA., & GRUNE-LOFFLERS. (2021). Uso de Chelex-100 para el diagnóstico molecular de cinco patógenos de animales. FAVE Sección Ciencias Veterinarias, 20(1), 26-33. https://doi.org/10.14409/favecv.v20i1.9724